Introducción: Mycoplasma genitalium es uno de los principales patógenos de trasmisión sexual, relacionado principalmente con el desarrollo de Síndrome Uretral y Síndrome de Flujo Vaginal, tanto en hombres y mujeres. El aislamiento de este microorganismo resulta difícil y consumidor de tiempo, por lo que muy pocas cepas se encuentran disponibles a nivel internacional para la realización de estudios de susceptibilidad antimicrobiana. Por otro lado, el tratamiento de estas infecciones en Cuba se realiza de manera sindrómica, y se desconocen los perfiles de susceptibilidad antimicrobiana de M. genitalium circulantes en el país. Objetivo:Determinar el perfil de susceptibilidad ante las drogas de primera y segunda línea, de aislamientos cubanos de M. genitalium en cultivos celulares. Materiales y Métodos:Se evaluaron cinco aislamientos de M. genitalium: tres de referencia y dos de pacientes cubanos. El crecimiento de M. genitalium en presencia de las diferentes concentraciones de antibióticos se detectó mediante la realización de una qPCR basada en el gen mgpB y la concentración mínima inhibitoria se definió como la concentración capaz de causar el 99% de inhibición del crecimiento. Resultados:De las drogas ensayadas, la azitromicina mostró ser la más activa frente a los aislamientos cubanos (MIC de ≤ 0,004 y 0,008 mg/litros). La levofloxacina fue menos activa (MIC 2 y 4 mg/litros), mientras que para la doxiciclina se obtuvo una MIC de 0,25 y 4 mg/litros.Conclusiones:Aunque el número de aislamientos fue bajo, los resultados sugieren que el tratamiento con doxiciclina y levofloxacina puede tener una baja eficacia en los pacientes cubanos infectados con M. genitalium. Probablemente, el uso de la azitromicina como droga de primera línea para estas infecciones resulta la terapia más efectiva contra las infecciones por M. genitalium. Según la literatura, este resultado es el primer reporte de estudios de susceptibilidad antimicrobiana de cepas autóctonas de M. genitalium en la región de Latinoamérica.